RPMI 1640培养基最初是为淋巴细胞培养专门设计的,现被发现适用于多种哺乳动物细胞,包括 HeLa 细胞、Jurkat 细胞、 MCF-7 细胞、PC12 细胞、PBMC 细胞、星形胶质细胞和癌细胞等。那么你知道该如何配置1640培养基吗?让我们一起来看看吧!
一、材料
1. 1640培养基粉末
2. 纯水
3. 无菌量筒或烧杯
4. pH试纸或pH计
5. 无菌培养瓶或离心管
6. 无菌滤器
二、步骤
1. 准备工作区域:确保实验室台面清洁,并使用消毒剂将台面消毒。
2. 洗手:che底洗手,并戴上实验手套。
3. 准备无菌器具:将无菌培养瓶或离心管、无菌滤器放入高压灭菌器中,按照厂商说明进行高压灭菌。
4. 准备1640培养基:根据需求量,称取适量的1640培养基粉末,放入无菌量筒或烧杯中。
5. 加入纯水:使用纯水,缓慢加入1640培养基粉末中,同时搅拌,直到溶解wan全,形成均匀的液体。
6. 调节pH值:使用pH试纸或pH计,检测培养基的pH值。如果需要调节pH值,可以加入少量的NaHCO3或NaOH(用于提高pH)或HCl(用于降低pH),并逐渐调节至目标pH值。
7. 过滤培养基:将调节好pH值的培养基通过无菌滤器过滤,以去除其中的微生物和杂质。
8. 分装培养基:将过滤好的培养基分装到已经高压灭菌的无菌培养瓶或离心管中,每个容器装满后紧密封闭。
9. 高压灭菌:将分装好的培养基放入高压灭菌器中,按照厂商说明进行高压灭菌,以确保培养基的无菌性。
10. 存储:将高压灭菌后的培养基存放在冰箱中,以防止其变质。
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