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Zymo EZ-96 DNA甲基化试剂盒-gold(D5008)现货供应

 更新时间:2024-04-11 点击量:439

产品名称:Zymo EZ-96 DNA甲基化试剂盒-gold(D5008)现货供应

产品货号:D5008

产品品牌:Zymo

产品简介:

DNA甲基化是原核生物和真核生物中自然发生的事件。在原核生物中,DNA甲基化提供了一种保护宿主DNA免受限制性内切酶消化的方法,该内切酶旨在消除外来DNA,而在高等真核生物中,DNA甲基化在基因表达的调节/控制中发挥作用。研究表明,异常DNA甲基化在癌症中是一种广泛的现象,可能是致癌过程中最早发生的变化之一。DNA甲基化也被证明在基因印迹、胚胎发育、X染色体基因沉默和细胞周期调控中发挥着核心作用。在许多植物和动物中,DNA甲基化包括通过甲基转移酶在胞嘧啶环的第五个碳位置添加甲基。哺乳动物的大多数DNA甲基化发生在5'-CpG-3'二核苷酸中,但也存在其他甲基化模式。事实上,哺乳动物基因组中约80%的5'-CpG-3'二核苷酸被发现是甲基化的,而20%未甲基化的核苷酸大多位于启动子内或基因的第一外显子中。

EZ-96 DNA 甲基化-Gold 试剂盒能够在不到3个小时的时间内将未被甲基化的胞嘧啶大规模(96孔离心板)转化成尿嘧啶。精心设计的亚硫酸氢盐化学方法结合了DNA的热变性和亚硫酸氢盐转化,以缩短孵育时间,并确保转化率高达99%以上。通过提取的亚硫酸氢盐转化DNA,可以进行PCR扩增,从而为下游分析提供理想的选择,包括核酸内切酶消化、测序和微阵列等技术。

样品处理:

1.将130µl的CT转换试剂添加到转换板中的每个DNA样品的20µl*中。如果DNA样品的体积小于20µl,则用水弥补差异。通过上下移液混合样品。

2.用提供的薄膜密封板。将转换板转移到热循环仪上,并执行以下步骤:

(1)98°C,持续10分钟

(2)64°C,持续2.5小时

(3)4°C储存长达20小时

注:4°C储存步骤是可选的。对于某些样本,替代参数可能会产生更好的结果(见附录)。如果您一直在使用该试剂盒,并在与上述不同的反应条件下获得了良好的结果,您可以继续使用相同的条件。

3.将600µl M-结合缓冲液添加到安装在收集板上的Zymo Spin™I-96结合板的孔中。

注:结合板每孔的容量为1.1 ml。收集板每孔容量为800µl。必要时清空收集板,以防止污染。

4.将样品从转换板(步骤2)转移到ZymoSpin™I-96结合板的孔中。通过上下移液混合。

5.以≥3000 x g(最大5000 x g)离心5分钟。丢弃流通管。

6.向板的每个孔中加入400µl的M-Wash缓冲液。以≥3000 x g离心5分钟。

7.向每个孔中加入200µl M-脱硫缓冲液,并使板在室温(20-30°C)下静置15-20分钟。培养后,以≥3000 x g离心5分钟。丢弃流通管。

产品选购:

货号

产品名称

规格

D5008

EZ-96 DNA Methylation-Gold Kit (Deep-well)

2 x 96 Rxns

D5007

EZ-96 DNA Methylation-Gold Kit (Shallow-Well)

2 x 96 Rxns

北京百奥创新科技有限公司,现货供应Zymo EZ-96 DNA甲基化试剂盒-gold(D5008),欢迎选购!


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